正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。 他们合力与恶势力展开斗争……
演员：保罗·盖恩斯 梅甘·沃德 拉尔夫·韦特 比尔·莫斯利 伊芙·拉茹 杰克·麦吉 Elizabeth Maclellan Katherine Armstrong 约翰·戴维斯·钱德勒 克里斯托弗·洛根
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演员：玛丽-露易丝·帕克 汉娜·珀尔·厄特 阿尤·艾德维利 克里斯·维塔斯凯 史蒂文·迈尔 麦迪森·布洛克 雅各布·邦德 小詹姆斯·希利 哈里斯·于林 艾迪·卡希尔 里克·穆斯 罗伯托·埃斯科巴 伊曼·克罗松 Carlos Jacott Jennifer Bassey Fern Katz Riley Fincher-Foster Michael Laurino Efren Hernandez James Benson
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